UHPLC-Q/TOF MS结合HPLC-DAD定性和定量分析硫酸黏菌素可溶性粉中的未知添加物

定性和定量分析一批兽药硫酸黏菌素可溶性粉中的未知添加物。照《中国兽药典》2010年版一部对该批检品用微生物检定法进行含量测定时,发现该样品的抑菌圈为虚圈,用薄层色谱鉴别该样品,未显示与标准品溶液一致的主斑点,怀疑该样品中有处方外非法添加物。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UHPLC-Q/TOF MS)对该样品进行筛查,发现疑似添加物,并使用液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)法进行了双重确证和含量测定。该样品中非法添加物确证为磺胺氯达嗪和甲氧苄啶,添加量分别为58.5 mg/g和13.4 mg/g。本研究通过建立筛查方法为监管部门提供技术支撑,通过分析非法添加物的可能原因为打击兽药处方外非法添加提供了思路。     

Ultrastructure of the tubular glands in the isthmus region of the oviduct in laying and natural moulting commercial egg‐type chickens

The study investigated the ultrastructural characteristics of tubular gland and duct cells, as well as luminal gland cells in the isthmus region of the oviduct of laying and natural moulting hens. Tubular glands in laying birds were composed of type 1 and 2 cells. Based on the preponderance of each cell type, in relation to the location of a developing egg in the oviduct of the domestic fowl, these gland cells may represent different functional states of the same cell. The findings of the study on natural moulting birds suggest that autophagy is a process confined to the early stages of degeneration, while necrosis occurs in the terminal stages.     

中药添加剂对高温下猪血清抗氧化功能的影响

为探讨中药添加剂对高温应激仔猪抗氧化功能的调控效果,选用35日龄中国实验用小型猪64头,分为对照组、应激组和2个中药添加剂组(方1、方2),分别于试验第1,2,4,6,10天采血清,测定超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)的含量变化。结果发现:与对照组相比,应激组猪血清SOD活力在第1天显著升高;MDA含量在第6天显著升高;GSH-Px活力在第6和10天显著高于常温组(P<0.05)。与应激组相比,方2组的GSH-Px活力在第2天显著升高,方1和方2组MDA含量在第10天显著降低(P<0.05)。表明高温状态下,猪体内MDA含量增加,GSH-Px活性增强;中药添加剂能促进热应激仔猪抗氧化功能的恢复和提高,且方2效果优于方1。     

高免卵黄液的制备及其口服对鸡传染性法氏囊病的防治效果

作者制备了传染性法氏囊病的高免卵黄液,并对其口服防治效果进行了研究。患有鸡传染性法氏囊病的600只上海土鸡经投用抗生素药物治疗4 d无效后,采用口服高免卵黄液（2 ml/只）进行治疗,每天口服2次。1 d后,有12只发生死亡,其余鸡只逐渐恢复正常（治愈率98%）。表明高免卵黄液对治疗鸡传染性法氏囊病有良好的临床效果,同时也反映出口服高免卵黄液是一种较好的免疫途径和方法。     

禽呼肠孤病毒C-98分离株L1基因的克隆与序列分析

参考禽呼肠孤病毒S1133株（GenBank）L1基因序列设计3对特异性引物,采用RT-PCR方法对禽呼肠孤病毒内蒙古分离株C-98的L1基因进行了克隆和序列测定。结果表明：获得的C-98 L1基因全长3959 bp,其中包括21 bp的5’非编码区和56 bp的3’非编码区,阅读框位于5’端第22位核苷酸与3’端第3903位核苷酸之间。将C-98株与国内外禽呼肠孤病毒群和哺乳动物呼肠孤病毒群的不同分离株进行序列比较,结果显示：C-98与台湾地区分离株919和美国分离株1733、2408、S1133亲缘关系最近,其核苷酸同源性分别为99.8%、99.7%、99.7%、99.4%;与哺乳动物呼肠孤病毒L3基因核苷酸及其编码的氨基酸同源性较低,为43%～45%。     

五味子萃取物有效成分含量测定及其对鸡肉中肌苷酸含量的影响

作者采用高效液相色谱测定五味子萃取物有效成分含量,并研究其对肉仔鸡胸肌、腿肌肌苷酸含量的影响。试验选择1日龄艾维茵肉仔鸡200羽,公母各半,随机分为5组,每组设4个重复,每个重复10羽。各组间鸡体重无统计学上的差异（P>0.05）,试验全期56 d。空白组饲喂基础日粮（不添加任何药物）,试验组分别在基础日粮中添加黄霉素5 mg/kg、五味子萃取物0.1%、0.2%、0.4%。56日龄屠宰试验鸡,取胸肌、腿肌肉,测定肌苷酸含量。研究结果表明,各试验组胸（腿）肌肌苷酸含量均高于空白组与黄霉素组,其中0.4%五味子萃取物组与空白组和黄霉素组相比差异显著（P<0.05）。     

生长猪高蛋白豆粕氨基酸回肠可消化率的研究

选用10头健康回肠末端安装简单T型瘘管的杂交(杜×长×大),阉公猪体重(37.8±0.7)kg,采用有重复5×5拉丁方设计,比较4种不同豆粕产品(去皮与带皮高蛋白豆粕,去皮与带皮常规豆粕)在生长猪的氨基酸回肠表观和真消化率。结果表明:豆粕加工类型显著地影响豆粕中氨基酸回肠表观和真消化率,除精氨酸外,去皮豆粕氨基酸回肠表观消化率显著高于带皮豆粕(P<0.05);去皮豆粕必需氨基酸中的组氨酸、亮氨酸、蛋氨酸和苏氨酸均显著高于带皮豆粕(P<0.05)。与常规豆粕相比,高蛋白豆粕中苯丙氨酸、色氨酸、缬氨酸、丙氨酸的回肠表观消化率显著提高(P<0.05),这预示着高蛋白豆粕是生长猪的优良蛋白质和氨基酸来源。     

鸭源致病性大肠杆菌的血清型鉴定及其相关毒力基因分析

自规模化养鸭场患典型大肠杆菌败血症雏鸭分离的282株致病性大肠杆菌（E.coli）中鉴定出210株（包含37种血清型）,其中O93、O78、O92、O76占43.8%（92/210）为优势血清型,O46、O32＆O93混合型、O60＆O93混合型为首次从鸭群中分离到。应用PCR结合核酸序列测定对210株致病性E.coli（鸭大肠杆菌病分离株）和28株自健康雏鸭泄殖腔拭子分离的E.coli（临床健康鸭大肠杆菌分离株）进行包括强毒力岛（HPI）中的鼠疫菌素受体基因（fyuA）和铁调节蛋白基因（irp2）、Ⅰ型菌毛必需蛋白基因（fimC）、P型菌毛结构基因（papA）和血清耐受基因（iss）检测,结果表明：fyuAi、rp2、fimC、papA和iss基因在鸭大肠杆菌病分离株的携带率分别为41.0%、43.3%、92.9%、97.6%和96.7%,在临床健康鸭大肠杆菌分离株的携带率分别为21.4%、25.0%、92.9%、100%和92.9%,患病鸭和临床健康鸭大肠杆菌分离株iss、fimC和papA携带率差异不显著（P〉0.05）,但papA的携带率均显著高于其他宿主（鸡、猪和人）源E.coli;HPI毒力岛在鸭源E.coli中分布较广,其携带率表现为鸭大肠杆菌病分离株极显著高于临床健康鸭大肠杆菌分离株。HPI毒力岛的携带率与菌株的致病性呈明显的正相关,与O78等特定的血清型有一定的关系。鸭大肠杆菌病分离株有37.6%（79/210）同时携带fyuAi、rp2、fimCi、ss和papA基因,极显著高于健康鸭大肠杆菌分离株的14.3%（4/28）（P〈0.01）。     

血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析

用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19（血清1型）、P1059株（血清3型）,提取外膜蛋白（OMPs）,SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60．5ku铁调控外膜蛋白（IROMPs）。以C48-19株攻毒后耐过的鸡血清作为抗体进行免疫印迹,检测到其中的87、79和60．5ku蛋白是2株细菌共同的、具有交叉免疫反应性的IROMPs,推测这3种蛋白可能是这2个菌株的共同抗原,并可能在C48-19感染的鸡体内特异表达;对鸡胚尿囊液中培养的C48-19株OMPs的SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验,也观察到类似IROMPs的表达。这些IROMPs的发现为亚单位疫苗的研制提供了候选蛋白。     

性激素对非酒精性脂肪变性肝炎(NASH)的保护作用研究

本文旨在研究雌、雄激素对高脂饮食诱导产生的非酒精性脂肪变性肝炎(NASH)的保护作用及其机制。实验采用高脂饲料诱导大鼠的方法,先将成年雄性SD大鼠去势,用含15%猪油和1.25%胆固醇的高脂饲料诱导90d,成功地诱导了大鼠脂肪变性肝炎。在此基础上,皮下注射性激素来研究其对NASH的作用。将去势大鼠分为8个处理组,普通饲喂组(C1)、高脂饲喂组(C2)、高脂饲喂+低剂量雌激素组(lE)、高脂饲喂+高剂量雌激素组(hE)、高脂饲喂+低剂量雄激素组(lD)、高脂饲喂+高剂量雄激素组(hD)、高脂饲喂+低剂量雌激素+低剂量雄激素组(lED)、高脂饲喂+高剂量雌激素+高剂量雄激素组(hED)。每个处理10只鼠,共处理90d。组织学染色结果显示,各激素处理组明显减少了NASH的肝脏内脂肪的沉积。单一的雌激素或雄激素作用效果明显低于雌雄激素的协同作用。基因表达(mRNA)定量分析表明,该作用是通过上调肝脏内FAS、ACC和下调IL-6、TNF-α来实现的,即增加了脂肪酸的从头合成并抑制了IL-6和TNF-α介导的发炎途径。本实验为实现性激素对高脂饮食诱导的NASH治疗提供了基础性的实验依据。